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ELISA試劑盒影響反響因素較多，特別是固相載體的包被難到達(dá)各個(gè)別之間的共同，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)驗(yàn)均須用一系列不一樣濃度的參閱規(guī)范品在一樣的條件下制作規(guī)范曲線。
測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA試劑盒，規(guī)范曲線的規(guī)模通常較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢查物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)銜接，所得曲線通常呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中心較呈直線的有些是的檢查區(qū)域。在實(shí)驗(yàn)條件(包含試劑)較難確保穩(wěn)定的情況下，這種判別法較為適宜。
ELISA試劑盒在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的A值后，核算S/N值。也有寫作P/N的，這兒的P不代表陽性ELISA試劑盒(positive)，而是患者(patient)的縮寫，不該誤解。為防止混雜，更宜用S/N表明。在前期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽性規(guī)范，現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿襲。實(shí)際上每一測(cè)定體系應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)留意的是，N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。
有的ELISA試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，致使反響后發(fā)生的本底也許較正常人血清的本底低得多。定性測(cè)定的成果判別是對(duì)受檢標(biāo)本中是不是含有待測(cè)抗原或抗 出"有"或"無"的簡(jiǎn)略答復(fù)，分別用"陽性"、"陰性"表明。"陽性"表明該標(biāo)本在該測(cè)定體系中有反響。"陰性"則為無反響。用定性判別法也可得到半定量成果，即用滴度來表明反響的強(qiáng)度，其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性實(shí)驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中，將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，呈陽性反響的zui高稀釋度即為滴度。依據(jù)滴度的高低，能夠判別標(biāo)本反響性的強(qiáng)弱，這比調(diào)查不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判別為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義。 在間接法和夾心法ELISA試劑盒中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA試劑盒中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反響的成果判別方法不一樣，分述于下。